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Recovery (% +/- SEM)

6t-LTB

+ 6t,12e-LTB

92,0  3,1

LTB

90,8  1,4

5-HETE

71,9  4,1

6t-LTB

+ 6t,12e-LTB

86,4  1,9

LTB

87,8  2,8

5-HEPE

76,1  3,6

Tabelle 2: Recovery-Daten aus 6 unabhängigen Versuchen. Angaben in Pro-

zent.

2.2.7. Messung der Adhärenz

Die Messung der Adhärenz von PMN auf HUVECs erfolgte mittels radioaktiver Markie-

rung der PMN mit [

111

In]-Tropolonat nach der Methode von Danpure, Osman und Brady (

Zur Herstellung des Indium-Tropolonat-Komplexes wurde [

111

]In-Chlorid der Firma

Amersham zunächst in 0,04 M Salzsäure verdünnt auf eine Konzentration von 4 µCi/ml. Diese

Lösung wurde im Verhältnis 1:10 mit Tropolone gemischt und 15 Minuten im Wasserbad bei

37°C aufbewahrt.

Die Isolation der PMN erfolgte wie oben beschrieben. 70 Mio. PMN wurden anschlie-

ßend in 3ml HBS-Puffer suspendiert und 300 µl des Indium-Tropolonat-Komplexes zugegeben.

Diese Suspension wurde weitere 15 Minuten im Wasserbad bei 37°C inkubiert. Es folgten 2

Waschschritte mit HBS-Puffer in der Zentrifuge (300 x g für 5 Min.).

Die radioaktiv markierten PMN wurden auf HUVECs gegeben (Zellzahl 2,5 Mio. pro

Well), die vorher mit 1 ng TNF-α pro Well für 2 Stunden inkubiert worden waren. Nach 15

Minuten Sedimentationszeit wurde mit 0,1 µM FMLP pro Well für 15 Minuten stimuliert. Der

Ansatz wurde auf Eis abgestoppt und die Überstande abpipettiert. Zusätzlich wurden die auf den

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